L-蘇氨酸的工業生產方法主要有：①合成法；②發酵法；③蛋白質水解法三種。現提倡用發酵法生產。
方法一、直接發酵法：
1.發酵法是以糖、氨、高絲氨酸為培養基，用產谷氨酸小球菌等發酵后精制可制得L-蘇氨酸。
以葡萄糖為原料，選育營養缺陷型兼結構類似物合成中的反饋抑制與阻遏，達到L-蘇氨酸產酸率為18g/L，谷氨酸棒狀桿菌，產酸率為14g/L，黏質賽桿菌率14g/L。
葡萄糖[黃色短桿菌、谷氨酸棒桿菌、黏質賽桿菌等]→L-蘇氨酸。2.用產谷氨酸小球菌或短桿菌、棒桿菌等使糖類、氨、高絲氨酸發酵后，再經過精制而制得，發酵液中濃度可達5～20g/L。
3.以巴豆酸或以甘氨酸為原料制得。也可以葡萄糖或淀粉為原料，經由大腸桿菌、黃色短桿菌、谷氨酸桿菌或鈍齒棒桿菌為菌種經發酵精制得產品。
方法二、化學合成法：
因化學合成所得的蘇氨酸（L-蘇氨酸）為4種光學異構體的混合物，即DL-蘇氨酸。其中構成蛋白質的氨基酸為L型蘇氨酸，故需將蘇體從別體中分離出來，再進一步進行光學異構體拆分，以得L-蘇氨酸。
