用于制嬰兒食品、糖果、人造奶油等。醫藥上用作矯味劑，可由乳清提取而得。

α-乳糖水合物在藥品生產中被廣泛使用，在固體制劑中被作為填充劑、助流劑、崩解劑、潤滑劑和黏合劑，在凍干制劑中被作為賦形劑。

乳糖和其它糖類一樣都是人體熱能的來源。牛乳中的總熱量的1/4來自乳糖。 

除供給人體能源外，乳糖還具有與其它糖類所不同的生理意義。乳糖在人體胃中不被消化吸收，可直達腸道。在人體腸道內乳糖易被乳糖酶分解成葡萄糖和半乳糖，以被吸收。半乳糖是構成腦及神經組織的糖脂質的一種成分，對嬰兒的智力發育十分重要，它能促進腦苷和黏多糖類的生成。乳糖能促進人體腸道內某些乳酸菌的生成，能抑制腐敗菌的生長，有助于腸的蠕動作用。由于乳酸的生成有利于鈣以及其它物質的吸收，能防止佝僂病的發生，嬰兒食品中常強化乳糖。